Pirmasis sėkmingo ELISA eksperimento žingsnis – tinkamos ELISA plokštelės pasirinkimas

TheELISAplokštelė yra nepakeičiamas ELISA, su fermentais susieto imunosorbento tyrimo, įrankis.Yra daug veiksnių, turinčių įtakos ELISA eksperimentų sėkmei.Tinkamo įrankio pasirinkimas yra pirmasis žingsnis.Pasirinkus tinkamą mikroplokštę, eksperimentas bus sėkmingas.

Medžiaga išELISAPlokštė paprastai yra polistirenas (PS), o polistirenas turi prastą cheminį stabilumą ir gali būti ištirpintas įvairiuose organiniuose tirpikliuose (pvz., aromatiniuose angliavandeniliuose, halogenintuose angliavandeniliuose ir kt.), o jį gali korozuoti stiprios rūgštys ir šarmai.Neatsparus riebalams ir lengvai keičia spalvą po UV spindulių poveikio.

Kokių tipųELISAlėkštės yra?

✦Rinktis pagal spalvą

Skaidri plokštė:tinka kiekybiniams ir kokybiniams kietosios fazės imunologiniams tyrimams ir surišimo tyrimams;

Balta plokštelė:tinka savaiminiam liuminescencijai ir chemiliuminescencijai;

Juoda plokštė:tinka fluorescenciniams imuniniams tyrimams ir surišimo tyrimams.

✦ Pasirinkite pagal surišimo stiprumą

Mažai surišama plokštė:Pasyviai jungiasi su baltymais per paviršiaus hidrofobines jungtis.Jis tinka kaip kietosios fazės nešiklis stambiamolekuliniams baltymams, kurių molekulinė masė >20 kD.Jo gebėjimas surišti baltymus yra 200–300 ng IgG/cm2.

Aukšta rišimo plokštė:Po paviršiaus apdorojimo jo baltymų surišimo pajėgumas labai padidėja, pasiekiant 300–400 ng IgG / cm2, o pagrindinio surišto baltymo molekulinė masė yra > 10 kD.

✦ Rūšiuoti pagal apatinę formą

Plokščias dugnas:mažas lūžio rodiklis, tinkamas aptikti su mikroplokštelių skaitytuvais;

U apačioje:Lūžio rodiklis yra didelis, todėl patogu pridėti, įsiurbti, maišyti ir atlikti kitas operacijas.Galite tiesiogiai stebėti spalvos pokyčius vizualiai apžiūrėdami, nedėdami jo ant mikroplokštelių skaitytuvo, kad nustatytumėte, ar yra atitinkama imuninė reakcija.