Specifiniai ląstelių kultūros žingsniai

1. Bendra įranga

1. Įranga paruošimo kambaryje

Viena distiliuoto vandens distiliavimo aparatas, dvigubas distiliuoto vandens distiliatorius, rūgšties bakas, orkaitė, greitpuodis, laikymo spinta (nesterilizuotiems gaminiams laikyti), laikymo spinta (sterilizuotiems gaminiams laikyti), pakavimo stalas.Įranga tirpalo ruošimo patalpoje: sukimo svarstyklės ir elektroninės svarstyklės (svėrimo vaistas), PH matuoklis (matuoja kultūros tirpalo PH vertę), magnetinė maišyklė (tirpalo kambario konfigūravimas tirpalui maišyti).

2. Kultūros kambario įranga

Skysto azoto bakas, laikymo spinta (įvairioms reikmėms laikyti), fluorescencinė lempa ir ultravioletinė lempa, oro valymo sistema, žemos temperatūros šaldytuvas (-80 ℃), oro kondicionierius, anglies dvideginio balionas, šoninis staliukas (testo įrašų rašymas).

3. Įranga, kuri turi būti patalpinta sterilioje patalpoje

Centrifuga (ląstelių surinkimas), itin švarus darbo stalas, apverstas mikroskopas, CO2 inkubatorius (inkubavimo kultūra), vandens vonia, trijų deguonies dezinfekavimo ir sterilizavimo aparatas, 4 ℃ šaldytuvas (serumo ir kultūros tirpalo įdėjimas).

2, Aseptinis veikimas

(1) Sterilios patalpos sterilizavimas

1. Reguliariai valykite sterilią patalpą: kartą per savaitę iš čiaupo iš pradžių nuvalykite grindis, nuvalykite stalą ir nuvalykite darbo stalą, o tada nuvalykite 3 ‰ lizolio arba bromogeramino arba 0,5% peracto rūgšties.

2. CO2 inkubatoriaus (inkubatoriaus) sterilizavimas: pirmiausia nuvalykite 3 ‰ bromogeraminu, tada nuvalykite 75% alkoholiu arba 0,5% peracto rūgštimi, o tada apšvitinkite ultravioletine lempa.

3. Sterilizacija prieš eksperimentą: atitinkamai 20-30 minučių įjunkite ultravioletinę lempą, trijų deguonies sterilizatorių ir oro valymo sistemą.

4. Sterilizacija po eksperimento: itin švarų stalą, šoninį stalą ir apverstą mikroskopo stalą nuvalykite 75 % alkoholiu (3 ‰ bromogeraminu).

Laboratorijos personalo paruošimas sterilizacijai

1. Nusiplauk rankas su muilu.

2. Dėvėkite izoliacinius drabužius, izoliacines kepures, kaukes ir šlepetes.

3. Nuvalykite rankas 75% alkoholio vatos tamponu.

Sterilios operacijos demonstravimas

1. Visi buteliai su alkoholiu, PBS, auginimo terpė ir tripsinu, patalpinti į itin švarų darbastalį, turi būti nuvalyti 75% alkoholiu nuo išorinio butelio paviršiaus.

2. Dirbkite šalia alkoholio lempos liepsnos.

3. Prieš naudojimą indai turi būti sterilizuoti.

4. Indai (pvz., butelių kamšteliai ir lašintuvai), kurie ir toliau naudojami, turi būti pastatyti aukštoje vietoje ir naudojimo metu vis tiek turi būti perkaitinti.

5. Visos operacijos turi būti atliekamos arti alkoholio lempos, o veiksmas turi būti lengvas ir tikslus ir neturėtų būti liečiamas atsitiktinai.Jei šiaudai negali liesti atliekų skysčio rezervuaro.

6. Siurbdami daugiau nei dviejų rūšių skystį, atkreipkite dėmesį į tai, kad pakeistumėte siurbimo vamzdį, kad išvengtumėte kryžminio užteršimo.

Apie instrumentų dezinfekciją žr. kitą skyrių.