Kaip moksliškai ir teisingai naudoti kriokonservavimo vamzdelį
Kriokonservavimo vamzdžio naudojimas yra mokslas, o ne paprasta trilogija, tokia kaip skysto azoto bako atidarymas, įdėjimas į šaldymo vamzdelį ir skysto azoto bako uždarymas.Moksliškai ir teisingai naudojant kriokonservavimo mėgintuvėlius galima išvengti mėginių praradimo ir apsaugoti testuotojus.
Kriokonservavimo vamzdžio naudojimas yra mokslas, o ne paprasta trilogija, tokia kaip skysto azoto bako atidarymas, įdėjimas į šaldymo vamzdelį ir skysto azoto bako uždarymas.Moksliškai ir teisingai naudojant kriokonservavimo mėgintuvėlius galima išvengti mėginių praradimo ir apsaugoti testuotojus.
Užšaldymo vamzdis: užšalimo žingsniai
Nuplaukite ląsteles pašildytu PBS tirpalu, išsiurbkite tirpalą ir uždenkite ląsteles tirpalu, kuriame yra tripsino ir EDTA (pakanka plono skysčio sluoksnio, o tripsino ir EDTA koncentraciją reikia nustatyti pagal ląstelių liniją).
Inkubuokite ląsteles 37 ℃ temperatūroje 3–5 minutes.
Kai ląstelės atsiskiria nuo dugno, inkubacija nutraukiama, įpilama terpė, kurioje yra serumo, ir ląstelės švelniai suspenduojamos pipete.
Centrifuguokite ląstelių suspensiją (500 xg, 5 min.) ir resuspenduokite terpėje, kurioje yra serumo.
Ląstelių skaičius.
Centrifuguokite ląstelių suspensiją (500 xg, 5 minutes), pašalinkite supernatantą ir pakartotinai suspensuokite ląsteles terpėje, kurioje yra atitinkamo tūrio serumo.
Sumaišykite ląsteles ir kriokonservavimo tirpalą (60% terpės, 20% galvijų vaisiaus serumo, 20% DMSO) tūrio santykiu 1:1, tada perkelkite į Cryo STM kriokonservavimo mėgintuvėlį.Užšaldytų ląstelių tankis yra 1-5 × 106 vnt./ml.
Kriokonservavimo mėgintuvėlyje STM rekomenduojama atvėsti – 1 K/min greičiu, o šaldymo vamzdelį galima įdėti į indą, kuriame yra izopropanolio esant –70 ℃.Jei Cryo STM kriokonservavimo mėgintuvėlyje laikomi kiti mėginiai, kurie gali būti tiesiogiai dedami į –20 ℃, –70 ℃ arba skysto azoto dujinę fazę.Siekiant užtikrinti, kad mėginys būtų užšaldytas tolygiai, 4 mL ir 5 mL Cryo sTM kriokonservavimo mėgintuvėlį reikia įdėti į šaldytuvą –20 ℃ nakčiai, o tada perkelti į –70 ℃ dujinę fazę arba skystą azotą.
Tada perkelkite Cryo.sTM kriokonservavimo mėgintuvėlį į skysto azoto baką.Kad išvengtumėte taršos (pvz., mikoplazmos) ir saugumo sumetimų, Cryo.sTM kriokonservavimo vamzdelį įdėkite į skysto azoto dujinę fazę, o ne į skystąją fazę.
Kaip moksliškai ir teisingai naudoti kriokonservavimo vamzdelį?Mūsų kompaniją sudaro profesionalai, turintys pramonės išsilavinimą ir didelę rinkos patirtį, teikiantys produktus gyvybės mokslų tyrimų sričiai ir paslaugas mokslo tyrėjams.Jis gali ne tik patenkinti specialius MTTP klientų reikalavimus dėl produktų tipų ir pakuotės, bet ir patenkinti visapusiškus gamybos įmonių poreikius visais etapais nuo mažos, vidutinės iki didelės apimties gamybos.
Paskelbimo laikas: 2022-11-25