Centrifuginis vamzdelis yra paprastas vamzdelis, galintis atlaikyti didelį sukimosi greitį ir slėgį, pvz., atskirti kai kuriuos mėginius ir atskirti supernatanto nuosėdas.Ultrafiltravimo centrifugos vamzdelis turi dvi dalis, panašias į vidinį ir išorinį vamzdelį.Vidinis vamzdis yra tam tikros molekulinės masės membrana.Centrifuguojant dideliu greičiu, tie, kurių molekulinė masė mažesnė, nutekės į apatinį mėgintuvėlį (ty išorinį), o tie, kurių molekulinė masė didesnė, bus įstrigę viršutiniame (ty vidiniame) mėgintuvėlyje.Tai yra ultrafiltravimo principas ir dažnai naudojamas mėginiams koncentruoti.
Ultrafiltraciniai centrifuginiai mėgintuvėliai paprastai gali būti naudojami be išankstinio apdorojimo, tačiau baltymų mėginiams apdoroti, ypač atskiestų baltymų tirpalams (< 10 ug/ml), koncentracijos atkūrimo greitis naudojant ultrafiltravimo membranas dažnai nėra kiekybinis.Nors PES medžiagos sumažina nespecifinę adsorbciją, kai kurie baltymai, ypač kai jie yra praskiesti, gali turėti problemų.Nespecifinio prisijungimo laipsnis skiriasi priklausomai nuo atskirų baltymų struktūros.Labiau tikėtina, kad baltymai, turintys įkrautų arba hidrofobinių domenų, negrįžtamai prisijungs prie skirtingų paviršių.Pasyvinis išankstinis ultrafiltravimo centrifugos vamzdžio paviršiaus apdorojimas gali sumažinti baltymų adsorbcijos praradimą membranos paviršiuje.Daugeliu atvejų išankstinis kolonėlės apdorojimas prieš koncentruojant praskiestą baltymų tirpalą gali pagerinti regeneravimo greitį, nes tirpalas gali užpildyti tuščias baltymų adsorbcijos vietas, esančias ant membranos ir paviršiaus.Pasyvavimo būdas yra iš anksto mirkyti kolonėlę didesniu pasyvinimo tirpalo tūriu ilgiau nei 1 valandą, kolonėlę kruopščiai nuplauti distiliuotu vandeniu ir vieną kartą centrifuguoti distiliuotu vandeniu, kad visiškai pašalintų pasyvinimo tirpalą, kuris gali likti ant plėvelės. .Būkite atsargūs, kad po pasyvavimo plėvelė neišdžiūtų.Jei norite naudoti vėliau, turite įpilti sterilaus distiliuoto vandens, kad plėvelė išliktų drėgna.
Ultrafiltracinių centrifugų mėgintuvėlių paprastai negalima sterilizuoti ir naudoti pakartotinai.Kadangi vieno mėgintuvėlio kaina nėra pigi, daugelis bando jį panaudoti pakartotinai – patirtis tokia, kad membranos paviršių daug kartų nuvalyti distiliuotu vandeniu ir vieną ar du kartus centrifuguoti.Nedidelį vamzdelį, kurį galima centrifuguoti atvirkščiai, galima panardinti į distiliuotą vandenį ir tada centrifuguoti atbuline eiga daugiau kartų, o tai bus geriau.Jis gali būti naudojamas tam pačiam mėginiui pakartotinai ir, kai jis nenaudojamas, gali būti mirkomas distiliuotame vandenyje, tačiau turi būti išvengta užteršimo bakterijomis.Nemaišykite skirtingų mėginių.Kai kurie žmonės sako, kad mirkymas 20% alkoholio ir 1n NaOH (natrio hidroksido) gali užkirsti kelią bakterijų augimui ir neleisti išdžiūti.Kol ultrafiltravimo membrana įsiskverbia į vandenį, negalima leisti jai išdžiūti.Tačiau kiti teigia, kad tai sunaikins membranos struktūrą.Bet kokiu atveju gamintojai paprastai nepalaiko pakartotinio naudojimo.Pakartotinis naudojimas blokuos filtro membranos porų dydį ir netgi sukels skysčio nuotėkį, o tai turės įtakos eksperimento rezultatams.
Paskelbimo laikas: 2022-05-05